高效液相色谱仪测定香草兰豆英中香兰素的含
2025/6/8 来源：不详北京中科白癜风医院地址 http://www.znlvye.com/
1、原理
试样进行抽提和稀释，加人内标物，用高效液相色谱仪分离，再用紫外检测器测定香兰素的含量。
2、试剂
分析纯试剂、蒸馏水、去离子水或相等纯度的水。
乙醇：95%(体积分数)。
甲醇：色谱纯
磷酸溶液:0.01mol/L,
流动相:用25份甲醇与75份稀磷酸混合。用膜过滤、脱气。
香兰素(4-经基一3一甲氧基苯甲醛)对照标样：纯度大于99%.
内标物:乙酞水杨酸，纯度大于99%。
3、香兰素储备液:
称取一定量的香兰素,精确至0.g。用流动相配制成为浓度为1g/L的标准储备液。
4、工作溶液
用流动相稀释储备液，获得工作溶液。香兰素工作溶液浓度为0.1gL，可在4℃下暗处保存不超过10天。
5、内标物溶液
将乙酞水杨酸溶解于流动相中，使其浓度为0.6g/L，称量时精确至0.g。
注:内标浓度应与样品溶液中香兰素浓度基本一致.
6、仪器
气密研磨器。
单标容量瓶，容量为mL和mL。
过滤膜，孔径为0.45um。
连续型索氏抽提仪，由下列部件组成。
连续型索氏抽提仪：mL索氏抽提器。
冷凝器。
mL磨口烧瓶。
热源:带有滑动变阻器或其他控热方式的电热套或油浴。
高效液相色谱仪:配紫外检测器;
色谱柱:C18，硅胶柱，5um-10um粒径。
注射器:用于高效液相色谱仪。
分析天平：精确度为0.g.
7、试样的制备
将样品(香草兰豆荚、切段或香草兰粉)研磨并使之充分混匀。称20g已制备好的样品，准确至0.g,在抽提仪器中用大约mL乙醇抽提试样16h，即溶剂进行25次~30次循环。
每g豆荚用1L溶剂抽提。将抽提物转移至一个mL的容量瓶中。用少量的乙醇清洗抽提仪器中的烧瓶数次，并将洗出液加人容量瓶中，乙醇定容并混合均匀。用流动相稀释该溶液10倍。
8、分析步骤
流动相流速大约为1mL/min，室温进行分析。
用10mL内标物与10mL根据制备的样品溶液混合。用膜过滤。待测定的物质的质量用式(2)计算:
(2)
注:式中的峰高可由其峰面积代替
